医学动物防制

2018, v.34(07) 671-675

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猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白的原核表达、纯化和鉴定
Prokaryotic expression,purification and identification of Porcine circovirus Ⅱ Cap protein

江嘉欣;王钊哲;许瑞;吴思敏;李嘉静;蔡爱群;林矫矫;洪炀;陆珂;李浩;陈兆国;石耀军;朱传刚;

摘要(Abstract):

目的对猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)Cap蛋白的主要B细胞抗原表位进行分析,构建Cap表达多表位的原核表达系统,并对表达的目的蛋白进行分析,为猪圆环病毒诊断试剂开发奠定基础。方法设计并合成PCV2Cap基因,与PET-28a(+)载体连接后并转入大肠杆菌BL21(DE3)中构建重组质粒PET-28(a)-Cap,对重组质粒进行诱导表达获得重组蛋白,通过His亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果重组质粒在大肠杆菌中成功表达,蛋白质分子量约为17.4 k Da,与预期相符;Western blot结果显示,重组蛋白可以与猪圆环病毒阳性血清发生特异性结合。结论PCV2 Cap蛋白的表达纯化为圆环病毒血清抗体诊断方法的建立,进而为养殖场有效监控猪圆环病毒的免疫保护情况奠定基础。

关键词(KeyWords): 猪圆环病毒;Cap蛋白;表达纯化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家重点研发计划(2017YFD0501306);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费(2017JB20)

作者(Author): 江嘉欣;王钊哲;许瑞;吴思敏;李嘉静;蔡爱群;林矫矫;洪炀;陆珂;李浩;陈兆国;石耀军;朱传刚;

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